抗独特型抗体白介素2ELISA检测试剂盒样本要求* x; e' D7 N, l" h' y4 y9 ]
1. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
! T; K( @ D' k* N! L* C& Q" ~ 2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。* M2 k) P P$ O, h* j( W$ s
白介素2ELISA检测试剂盒. p& H1 q7 P, c
操作程序
T! ]+ Z2 f) C! d 加样 详细操作流程请联系客服索要说明书)
2 P4 L4 ?9 V X) g. t U$ \ 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。, f7 ~0 y C% c. T' F5 s) ^' I
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。; k% Q5 X4 i# p& y) ~* i5 C: |+ e
显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。2. 倒出多聚赖氨酸溶液,用5ml PBS冲洗一次后,可立即使用,或存数周内使用。; _, Y5 v* H$ S. ], F
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
# ~$ e7 v, t! N$ j9 y 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。需要用eagles液一种为含枸椽酸和重碳酸氢钠的药片血液要全血时$ T- ~1 | v# B- u6 m; l# l& Q
结果判断; ?% Y) g2 V: x
1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)% {1 }1 m6 B8 ^( _/ I1 ^- J3 t. x
2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。
8 I# X! r: v) K% u+ W 3. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。冷冻管有可能因此而造成细胞污染为避免固醇类反应% M+ E$ N' e5 _4 l( i
4. 白介素2ELISA检测试剂盒标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。- |" o% @- m4 p
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