抗体CMC生物中性蛋白酶(NP)检测试剂盒试剂组成介绍如下- Z6 A: x/ \* N
中性蛋白酶(NP)检测试剂盒
, x+ M* F' A Y6 M 测定意义：
5 q5 J$ L1 U9 @& @! p6 m6 u( B, F NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。
0 W6 g9 G/ ~& t 测定原理：$ u# L( r0 r. D5 R7 T
中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。 L |7 e8 V; E
自备仪器和用品： E& E6 g/ [; r/ L
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸馏水。
8 R) _- [& ^7 d; N/ Q 试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存。; m5 m& L1 N/ @9 M1 I, z' ]
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加10 mL蒸馏水溶解。. [& e/ h* }, o; ~
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入20 mL试剂一，沸水浴中磁力搅拌溶解。（可在烧杯上盖一层保鲜膜，注意观察，避免水分全部蒸发，一般加热15-30分钟，该试剂为过饱和试剂，充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用）。# G, W+ s9 a) D$ L
试剂四：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加50 mL蒸馏水溶解。3 J, W& M; _" f0 x, Q, j. H1 \: ?
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存。
/ `, U% o4 y9 r' U- z7 ^5 K+ ]4 o7 L 标准品：液体1mL×1支，0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。. B5 ?) Y S$ W* ?
粗酶液提取：
, q; `* Z @. K8 g/ W1 ], a 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5——10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
! w5 O, B0 \3 X7 r# r5 n; V- T$ T 2.血清或培养液：直接测定。
* A7 `0 q$ q6 | 3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500——1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
% F6 X/ N1 T( k6 t4 Z2 T3 q) i1 M 注 意： 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
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