抗体CMC生物中性蛋白酶(NP)检测试剂盒试剂组成介绍如下
' d0 b* S% d! X3 H! {$ ~% L' u 中性蛋白酶(NP)检测试剂盒
; h( L& z8 M( z1 @ 测定意义：2 y6 A, u N H$ P( }/ ~
NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。
# y5 Q4 v; G! M& D 测定原理：) Y8 P- p3 u3 ?4 }
中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。
+ m2 I6 t' S. \; w( [ 自备仪器和用品：
7 j, v! N0 `) J" \5 p& C 可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸馏水。! U0 e' y# s9 G
试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存。
( P% V* \/ A+ {7 e3 n6 s* @ 试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加10 mL蒸馏水溶解。) X% ~, u* X p9 |4 c
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入20 mL试剂一，沸水浴中磁力搅拌溶解。（可在烧杯上盖一层保鲜膜，注意观察，避免水分全部蒸发，一般加热15-30分钟，该试剂为过饱和试剂，充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用）。- r, c6 E& D, Z6 D8 u8 Z
试剂四：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加50 mL蒸馏水溶解。8 O8 T# ]# x# f
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存。
0 Z) j/ Z5 \" e! \) e 标准品：液体1mL×1支，0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。
/ T7 q! q* C. \! y% }4 [ 粗酶液提取：
d$ q8 |3 X9 M. T2 E 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5——10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
4 E3 h# U) G. Z& f+ k4 q: F. Q 2.血清或培养液：直接测定。
* M. r3 ~, i& I* V 3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500——1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。9 `$ b* J7 a( E" ]9 t9 O1 Q8 f5 p
注 意： 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。/ A: m" j7 [2 n4 K3 _9 m( o
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