BsAb在ELISA试剂盒实验中，偶尔会遇到样品浓度挨近试剂盒的灵敏度就容易发生样本OD450值低于空白值的现象，特别是在血清和血浆样本中。这就有可能是基质效应导致的结果。; i+ A$ R H& r! C ~
S: ?' N" O0 U- h
什么是基质效应呢？
* W# X' E* O& {
2 e) ^$ {1 {/ Y 首先我们要知道什么是基质，基质是指样品中目标分析物以外的部分。由于基质成分会对分析过程有显著干扰，影响分析结果的准确性。业内把这些影响统称为基质效应。这是ELISA试剂盒开发和使用中需要避开的雷。
, C( F+ j5 R: U/ c0 D8 C) U3 s, Z' d) b, _( n# C5 l
如何判断ELISA试剂盒是否是基质效应呢？- h; e" w5 q9 @4 p0 b0 w2 u
. ^- ` ?5 J' j h( Z+ w; C: \ 当单个样本或少量样本值低于空白值时，可能是实验操作出现问题，这时应增加重复，进步操作技术。当许多样本都低于空白值时，应思考基质效应的影响，建立校正曲线予以修改。基质效应的原因错综复杂，有可能是样品中存在的基质导致原抗体的联络结合能力下降，便产生了样本值低于空白值的现象。导致样本值无法计算出数值，或许数值为负。- E- W/ U' Z0 y J V- X2 r
. \% j, H6 w0 t 虽然原因复杂，但有方法可以用来评估基质效应。6 [0 d3 @; Q* t/ d
! \, f6 p& c, {9 h; \5 ^" g 第一种方法是采用线性稀释，一般来讲，抗原和捕获抗体、检测抗体之间的结合作用很强，样品浓度被稀释并不影响它们的结合，而造成基质效应的非特异结合的力要弱很多，如果不断稀释样品，非特异结合造成的干扰会逐步减少，测量值也更接近真实值。没有基质效应时，无论如何稀释，测量值都和真实值吻合。而有基质效应时，稀释会造成非特异性结合比例的减少，测量值也相应地产生很大改变。
, ~5 k& y5 J, u# f( U8 `
2 l7 ]! F( y8 [1 f( D- j) C 第二种方法是掺入回收率实验，将低、中和高浓度的分析物掺入到已测定过浓度的样本中，掺入前后实测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率，回收率以百分比的形式呈现。回收率介于80-120%，才符合标准。
+ r6 J( M8 d/ D: n1 o1 U* R, F$ Y
|
