总所周知,细胞系开发流程试剂盒法可分为多种类型测定,是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技能。今天,我司技能专员为您解析ELISA试验三大常用办法的优势与劣势,一起跟着金斯瑞小编来看看吧!, x- d2 a( U2 S7 a, X
) @1 M3 r9 w( f3 R
一、直接法
$ \- V- v+ q5 E: a1 K6 Q# m1 |) @3 R0 G. h
将抗原直接固定在固相载体上,参与酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。: A0 X3 t( }! O/ M8 K
: a" s3 d- X' Y' \
优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。% r5 P$ h5 V. L
0 C* G0 u! @0 h/ M5 h# t) c
下风:试验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对前进。9 i; O3 s3 {4 E4 T+ q- r5 P
8 M, k1 k, x1 ~ W( u1 c
二、ELISA试剂盒间接法
; o4 N# u3 q# E' F6 I4 U4 f% K' |1 F! K5 Q+ M$ |9 v4 g- p
此测定办法与直接法类似,不同在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
7 @% k8 u9 r, p3 L" E+ A
3 {* K0 d$ H- Y- w+ V 优势:二抗能够加强信号,并且有多种选择能做不相同的测定分析。不加酶符号的一级抗体则能保留它多的免疫反响性。
1 [( e2 A j( N- D0 ]% L
6 @0 C+ |% I7 ^9 n& `3 |8 [) q 下风:交互反响发作的机率较高。
# q( ` X7 q! E0 C9 H0 Y
8 q% ^5 r& F& N p6 {& { 三、双抗体夹心法
7 M. t6 ?" Q$ j" A" K: \
) R5 p! i5 B; @- r- g9 v7 A& v 被检查的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检查抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要留心选择,才可防止交互反响或比赛相同的抗原结合部位。! \$ W, c( k* s- j+ q9 B6 p
: W& I2 K! w! v6 l# R: z 优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。
1 {' s1 T5 i; j, D& {# O6 a# F! E; N# D( D
|