双特异性抗体开发流程ELISA标准曲线是结果计算的尺子，标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。溶解、稀释标准品过程：% O/ I/ J- a' A; \
1. 粉末标准品短暂离心，让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。: j+ _( V; T t! |4 |# J
2. 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水，加水后轻柔涡旋震荡，室温静置溶解 10-30min，让粉末完全溶解。& T9 V' ]7 w( s5 P
注意：加水后暂不用移液枪吹吸，避免蛋白未溶解，枪头带出部分蛋白，待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。
1 V! J2 ?3 }8 D# Q, ~- s( p- q 3. 标准品梯度稀释:
' z4 ?! ^# V' T) V （1）标准品稀释液的选择：
; r. M, ]0 V/ _4 m0 B 若血清、血浆、组织匀浆样本，用试剂盒中的标准品稀释液，梯度稀释标准品。
( O1 Z1 H: V- l, m M 若细胞上清样本，建议用细胞培养基梯度稀释标准品。# Y. r4 @6 c, R9 z. S
（2）耗材准备：准备8个1.5Ml离心管，写上S1-S7、空白。- S% O/ B+ ?/ G: T3 C+ \8 c5 L& O
（3）梯度稀释：根据说明书，每管加入等体积的标准品稀释液（培养基）。吸取同体积溶解好的标准品到S1管中，吹打10次混匀，涡旋5S。从S1管中吸取同体积溶液到 S2管，吹打10次混匀，涡旋5s。同法稀释S3-S7浓度。1 K# A5 c( l7 H9 ?+ M+ Z
（4）空白: 标准品稀释液（培养基）作为空白即零浓度。
$ \. D) L! C" m% B 注意：梯度稀释标准品时，涡旋震荡混匀后可短暂离心，让到盖子、壁上的液体到管底，再开始稀释下个浓度。标准品溶解、梯度稀释是ELISA实验关键点，按以上方法梯度稀释就可！
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