双特异性抗体开发流程溶解稀释标准品过程

ningxueqin · 发表于 2023-11-22 23:09:37

　　双特异性抗体开发流程ELISA标准曲线是结果计算的尺子，标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。溶解、稀释标准品过程：
　　1. 粉末标准品短暂离心，让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。
　　2. 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水，加水后轻柔涡旋震荡，室温静置溶解 10-30min，让粉末完全溶解。
　　注意：加水后暂不用移液枪吹吸，避免蛋白未溶解，枪头带出部分蛋白，待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。
　　3. 标准品梯度稀释:
　　（1）标准品稀释液的选择：
　　若血清、血浆、组织匀浆样本，用试剂盒中的标准品稀释液，梯度稀释标准品。
　　若细胞上清样本，建议用细胞培养基梯度稀释标准品。
　　（2）耗材准备：准备8个1.5Ml离心管，写上S1-S7、空白。
　　（3）梯度稀释：根据说明书，每管加入等体积的标准品稀释液（培养基）。吸取同体积溶解好的标准品到S1管中，吹打10次混匀，涡旋5S。从S1管中吸取同体积溶液到 S2管，吹打10次混匀，涡旋5s。同法稀释S3-S7浓度。
　　（4）空白: 标准品稀释液（培养基）作为空白即零浓度。
　　注意：梯度稀释标准品时，涡旋震荡混匀后可短暂离心，让到盖子、壁上的液体到管底，再开始稀释下个浓度。标准品溶解、梯度稀释是ELISA实验关键点，按以上方法梯度稀释就可！

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