生物药研发生产平台小鼠ELISA试剂盒检测中通用规则

ningxueqin · 发表于 2023-11-21 19:57:17

　　ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。在检测时，受检标本（测定其中的抗原）与固相载体表面的抗体反应。洗涤后加入酶标记的抗体，通过反应结合在固相载体上。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
　　生物药研发生产平台ELISA试剂盒检测过程中通用规则如下：
　　1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。
　　2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
　　3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
　　4、实验时，要使底物避光保存。
　　5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
　　6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
　　7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
　　8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
　　9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
　　10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
　　11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
　　12、底物是光敏感的，要在临用前现配。
　　13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
　　14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
　　15、待检样品要澄清，否则会影响结果。
　　16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
　　17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
　　18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

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