ELISA试剂盒实验土壤/植物样本的采集及保存方法

ningxueqin · 发表于 2023-10-23 22:26:16

　　国内抗体药物生产公司ELISA试剂盒实验土壤/植物样本的处理方法
　　植物标本的精采集及保存
　　1、称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨；
　　2、加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过夜；
　　3、于4度，8000rpm，离心1小时，取上清；
　　4、上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%yimi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；
　　5、上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。
　　6.植物标本中相关酶或蛋白的测定：（粗提取）
　　1、新鲜植物组织请在液氮中充分研磨；
　　2、加入样品体积9倍的提取液（pH 7.4 PBS缓冲液）,3、请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。
　　土壤：称取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。如果是测分泌蛋白，直接取上清检测，测试细胞内蛋白，要破碎细胞。

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