国内抗体药物生产公司ELISA试剂盒实验土壤/植物样本的处理方法4 s0 |& P4 z( m
植物标本的精采集及保存: q2 R1 s& C5 v
1、 称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨； W, r& L' @% C
2、 加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过夜；; \& b5 H0 E1 d- R. R9 y8 U
3、 于4度，8000rpm，离心1小时，取上清；6 b$ E+ y- {5 w4 T# D
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%yimi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；! g7 [( m& `, G, y4 |9 y
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。. L9 U6 |# c/ W2 ~- Z$ g
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定：（粗提取）
+ i- L4 B1 O4 X& E3 Q 1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨；8 _( f& f* }* N6 N6 V0 V$ S" h
2、 加入样品体积9倍的提取液（pH 7.4 PBS缓冲液）,3、 请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。
" f3 c: d1 U9 {, K- _3 D 土壤：称取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。如果是测分泌蛋白，直接取上清检测，测试细胞内蛋白，要破碎细胞。 |
