稳定细胞系构建ELISA测定试剂盒手工操作

ningxueqin · 发表于 2023-10-21 21:48:02

　　稳定细胞系构建ELISA测定试剂盒操作技术的影响：
　　1）应保证清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸，以上的措施可以使“花板”降至低限度，从而提高检测的特异性，并得到更准确。
　　2）合理安排检测量，ELISA试剂盒以免反应板过多造成洗板等待时间长。
　　3）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
　　4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干，防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
　　5）严重溶血：以HRP为标记的ELISA试剂盒测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性。
　　减少ELISA测定试剂盒误差的方法
　　1.做实验时少说话，防止唾液掉进酶标条中。
　　2.加入一抗二抗需要放入37°。
　　3.如果同时做多个板子，多个板子别罗一起；尽量少用排枪。
　　4.加样时，由低浓度向高浓度加，这样减少跳孔的几率。
　　5.勤换枪头。
　　一、移液器的使用，加样（抗体）等需要准确定量的试剂时不使用排枪，经验证明排枪很不准确，极易跳孔，不要图便宜买低档的tips 因为ELISA不但会放大被检测的目的蛋白，也会放大非特异结合的杂质蛋白。
　　二、倍比稀释样品时，稀释倍数要小于10。
　　三、所有的装跟ELISA测定试剂盒相关试剂的容器，玻璃制品的要干烤过或者使用一次性的树脂容器。

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