ELISA试剂盒中抗体有包被抗体和酶标抗体,这两种抗体是一种抗体,前者没有酶标,后者用酶进行了标记. NCM-ELISA一般有一抗和二抗,这两种抗体不一样,前者(一抗)一般是鼠抗体或兔抗体,没有酶标,相对应的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗体,用酶进行标记.也有用马大规模备抗体的. TDS-ELISA是三抗体ELISA,第三级的抗体是将信号级联放大. 以上三种是比较常见的,还有其他一些试剂盒,可参考免疫学的内容.- o' X. k2 W: W% R9 k
生物标志物分析保证ELISA试剂盒安全性的方法:
: }; Z P% r/ r9 n 1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
; W+ k# v/ A7 ^ ]5 a 2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
2 t1 B3 T @# v0 }1 n3 L! ^ 3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。' D. g5 q: f# U$ A$ X
ELISA试剂盒的操作注意事项:* |3 o# Q: C0 k" `9 `
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。, z& A3 K8 a! d+ A6 F( }# w$ w6 F5 w! D
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6 r/ u/ r5 y( A- c& [ y2 {. z
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
% f3 h4 Q6 ?- Y( m+ F1 K( D% D 4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 u8 o0 s) f1 w4 P7 j1 ^
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。* v. D" t% ]8 Y! U# X& b; L
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
/ i5 ^0 W! F2 l! K- z3 [1 ^ ELISA试剂盒的样品收集、处理及保存方法:
6 S$ J, ?; k. k; e 1.血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
! f* y" E& z5 ]! q( t4 {, i, J$ J 2.血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
' `2 w" U! V: V; @6 m* A! ^ 3.细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 y i- T9 [; L1 j: L6 h" y
4.组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液# }' D p1 s: t: w$ U
5.保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。# x2 |. e2 Z8 c7 S
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