抗体药物研发公司ELISA试剂盒的细胞处理方法

ningxueqin · 发表于 2023-09-24 23:48:56

　　下面抗体药物研发公司要为大家介绍的是人ELISA试剂盒的细胞处理方法：细胞样本根据目的物所在部位可选择细胞裂解液或细胞培养上清作为样本。需要注意的是：因该类样本干扰因素较多，如细胞状态、细胞数量(大于10^6)、ph(约为7)、培养基盐离子浓度、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。如果目的物是分泌型，主要在胞外，即可选择细胞培养上清作为样本，如果目的物主要存在于胞内，则建议选择细胞裂解液作为样本类型。细胞培养上清处理方法相对简单，取细胞培养上清，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
　　细胞裂解液：
　　1、贴壁细胞需要先用消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）。
　　2、将收集到的细胞用冷PBS洗3次。
　　3、物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）：
　　超声破碎：取适量PBS重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
　　反复冻融：将待破碎的细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎。
　　4、将标本于2-8度1500×g离心10分钟，收集上清备用。
　　人ELISA试剂盒是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术，酶联免疫吸附试验的标准程序，通常是把蛋白、抗体、或激素等直接或是以捕捉抗体固定在固相载体上，再加入一级检测抗体，形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶标记了，即可用来直接测定抗原的量，若无，则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。

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