接触ELISA试剂盒实验多年，ELISA试剂盒操作过程复杂，从样本收集，实验操作，加样，洗涤，孵化都有很多注意事项，稍有不慎，将导致实验失败，单克隆抗体药物生产公司本章将就ELISA试剂盒操作过程中的问题，与大家一起探讨。
9 z+ d$ H% J3 @( K# o6 _& }/ N (1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
, x( A, B& W3 n( X (2)加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
: P: s3 N8 a) A. d$ `' L1 ~. |6 f7 r7 z (3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。$ V0 B- b; Z4 g, K
(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。* O, U: V! k( N% _
(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。0 I K: D" D/ w. O) F
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。- d* N- u7 L: h1 a' w
(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3 ] Q) P! x: X( z2 {% m8 y* _& X1 v& } (8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
t% e, I* A6 z1 d3 u (9)应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。
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