接触ELISA试剂盒实验多年,ELISA试剂盒操作过程复杂,从样本收集,实验操作,加样,洗涤,孵化都有很多注意事项,稍有不慎,将导致实验失败,单克隆抗体药物生产公司本章将就ELISA试剂盒操作过程中的问题,与大家一起探讨。# {2 m O8 G' Z% Z N
(1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
% N6 d! w, u' s u2 N& Q/ e( N (2)加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
c6 K# P+ K3 E (3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板"的出现。, Y, Y. X' R( J, k" W) O- b
(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。
' a; M* y$ U4 K' Z/ z) s% `3 z (5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
, J7 {/ G& c' i* f8 \) |- e4 V+ A (6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。# I/ c( n! |9 q: l* A8 i/ O
(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。. [2 L1 s9 f: a8 c3 d& e
(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。. }0 a5 Z9 R0 N, W1 R; |: g' q `3 D- }
(9)应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。
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