生物药cdmo血清是ELISA试剂盒实验前的必要标本之一，所以我们在做实验前需要对血清有个充分的了解，我们需要知道血清是怎么储存的，血清是怎么操作的。如果不清楚，没关系，让上海ELISA试剂盒来告诉您吧！
; B5 @8 |' v+ J5 n. o' }* L: d8 @ 1.血清必须贮存于–20～-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。
- |2 [- c! J* A7 T, z6 d; x1 U* x" v6 D 2.一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。
; @" N2 y4 K) W" T+ s 3.瓶装（500ml）血清解冻步骤（逐步解冻法-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀（小心勿造成气泡）,使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。7 }( ~$ G) Q+ x1 Z9 k7 t! o
4.heat-inactivation是指56℃,30分钟加热已*解冻之血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理之目的是使血清中之补体成份（complement）去活化。除非必须,一般不建议作此热处理,因为会造成沈淀物之显著增多,且会影响血清之品质。
' y9 u2 n- k# j- s6 q: L 5.勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。 p" c+ H! b" j3 E& Z* m
6.血清之沉淀物( s" F1 u) i# M* P* T
6.1.凝絮物：发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白（lipoprotein）变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白（fibrin）造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。6 D* [ e; Y& \" m: N; Z3 a1 b0 o
6.2.显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物“,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 |
