我司派遣资深技术为您解答Elisa实验过程中影响的因素有哪些。4 b% [: ?3 F' H8 C' J3 W }/ S; b
首先需要关键一步选择试剂:
6 W3 `" ^0 o/ |- K+ a 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
. E3 E2 D L5 T6 Y: l8 q( G/ b 体内药理参考准备ELISA实验的正确步骤#ELISA实验的事前准备工作一: M- |# \* r% Z
标本收集与保存:9 I& U9 x, @' W' O
避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;
7 A# Q, d: I) ` D a 2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。
: g9 U4 K8 _5 E [ 请避免反复冻融。. j6 O A/ V/ i2 b+ @" w2 U& x) H
具体请参照:
: R. s N1 c: O- @7 J* h ELISA实验标本的采集与处理:, n h! y& j) W0 @
ELISA实验标本的保存:
+ t$ n: p7 \4 U* \" U1 h9 n4 h" H 试剂使用中的准备工作及注意事项:
% O) C9 X: @; V2 Z6 i# Q/ _ 试剂盒中会有提示,一般需要准备的有:' s1 G7 T* E% }
洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。 [ Q2 r6 u! j7 q, |
显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;
3 V1 K2 M* m) b 标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存;有的是要现配制的;按照说明书操作;
Q0 V. K2 C4 h: \ S" N& N 浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);# ]9 \3 ~* d7 @# {5 i, y/ P
原则是:
; S# L! k9 P# F 试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;0 v' f8 p* M x) H
还有,小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以後总量不够。
9 S' Y/ c" T! u. a# P d# H5 G 加 样:+ j, |0 \/ }) w4 ^
室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大。特别要注意加样问题。* l6 b: x" b! ]3 \% V. T: Z
不好的操作原因:: B; U- e, ^3 n: T7 R' |
不会正确使用加样器;
% l: _ l( f% O 血清或血浆标本分离不好即进行加样;/ E; ?; F' \) a( Z! d
手工操作中,加样板过多造成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);) B) L% y& {2 R' A$ }# M
加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外;
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