我司派遣资深技术为您解答Elisa实验过程中影响的因素有哪些。
- m9 I* d: \0 ? 首先需要关键一步选择试剂:6 w# q0 N0 u: V) [
选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2 L w9 \4 o0 G3 E
体内药理参考准备ELISA实验的正确步骤#ELISA实验的事前准备工作一# s, d/ O& Y0 D& S' i' z
标本收集与保存:
/ k) Z9 H, K& @" c 避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;
5 W4 b5 x0 X) ]" ~- e 2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。
Y! b: Z- M0 k0 n( u+ z* A: _$ g 请避免反复冻融。: c6 W2 f. [! e
具体请参照:9 N: H/ S" P% E O |/ u0 A5 ]
ELISA实验标本的采集与处理:
: V8 L5 q$ \& C5 U- Q* o% Q9 m ELISA实验标本的保存:
/ a+ p% d& y. }( l1 x: h. R# E, t 试剂使用中的准备工作及注意事项:: l3 n9 y. X$ X
试剂盒中会有提示,一般需要准备的有:
2 \" V% z: j r! J: J" X 洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。. a8 F: o4 u( A2 s9 @4 j
显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;/ }7 o4 o3 g g7 b/ J7 E S. `2 k+ ~
标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存;有的是要现配制的;按照说明书操作;
: G$ G8 D1 {7 ~; k 浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);
4 ]# ]2 l' h; T4 u: r 原则是:4 T `# Y4 ]" |- A- b
试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;4 T8 @% y P2 [) _* t3 j S
还有,小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以後总量不够。8 h9 l) m& x# F6 F3 j" b I
加 样:
$ R3 C7 L" Q7 V0 J! b 室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大。特别要注意加样问题。. `$ u$ l& O4 @. v; r
不好的操作原因:
7 j3 p: P/ w4 s 不会正确使用加样器;
; ?5 t, m6 @2 A2 t1 L& \2 L 血清或血浆标本分离不好即进行加样;' F, J1 s8 F% \" ~
手工操作中,加样板过多造成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
" ^- Z. G/ O& T+ {, S( c q 加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外;
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