在常见的试剂实验中,我们经常会用到血清作为实验样本,那么血清的血涂片的质量控制是zui紧要的一步,以下要求少一步都不行.跟随金斯瑞来看看血涂片的质量控制有哪些要求.
2 A8 ^" c: v; s8 A: p 1.血膜片的质量要求是厚薄均匀适度,低倍镜下观察全片,慢病毒生产细胞不重叠,头尾及 两侧有一定的空隙,血膜头部有明确的病人标志.
, F5 X. K+ e8 X5 P1 Z- G, U$ l 2.些体积较大的特殊细胞常在血膜的尾部出现,因此蜡笔划线时应注意保存血膜 尾部细胞,血膜必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落.
1 g# x/ x1 h6 L' r 3.配制染料须用甲醇,稀释染液用缓冲液,因为缓冲液的pH 对细胞染色的影响很重要.在偏酸性环境中正电荷增多,在偏碱性环境中负电荷增多,又因为细胞着色 对氢离子浓度十分敏感.如果染色偏碱,原是紫红色的中性颗粒则染成深蓝色,造成识 别困难.冲洗须用中性水,虽亦可用自来水 (但不能保持稳定).
: {0 Y+ N! N x6 o3 ^ 4.对所用染液应进行预染试验,新配制的染液放置一段时间后其中的美蓝逐渐氧 化成天青B ,天青B 对细胞核的着色效果比美蓝好,因此,瑞氏染液放置时间越长染色 效果越好,临床上称之为成熟.判断染液成熟程度的简易方法是用正常血片做预染 试验,先用低倍镜观察载有染液的血片,认为着色满意后,再按照染色后冲洗顺序zui后 用油镜镜检,这样不仅可了解染液的成熟程度,而且还可以选择合适的染色时间,供临 床标本染色时参考.
! R; Z# l9 n5 h0 u 5.染液与缓冲液的比例要适当,以1∶27 为宜.一般说来缓冲液稀释度愈大,染色 时间愈长,细胞着色愈匀称、鲜艳.缓冲液和染液量要充足,否则染液很快蒸发,染料 沉淀于细胞上,使细胞深染而无法检查.细胞较多较厚的涂片 (如红细胞增多症) 染液 应多些.细胞较少的涂片染液应少些.) z" u. ?4 i. a4 N' o
6.染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关,染液愈淡,室温越低,细胞 愈多,所需时间越长,应适当增加染液浓度,因此必须根据情况灵活掌握.
$ V" C" c* t* U3 u9 l' k 7.染色良好的血膜片,外观呈浅红色,红细胞呈粉红色,白细胞核呈暗紫红色, 染色质结构能辨,粒细胞的颗粒呈固有种异颜色. |
