ELISA检测结果准确可靠需要品质好的试剂，良好的仪器和正确的操作。
% U8 [4 n; |7 e, a, N 病毒生产公司通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步。
- b% @. r w4 m 不同类型的样本的处理方法：
5 H9 d" F7 v1 f D. @ 1.血清; m" D* K; w% r
血清是常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。
; C' m3 p& r! y# D 用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。（最好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃1000×g离心20min，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。! Q @2 V4 l1 e, G+ v
采血过程中应避免溶血，因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染，因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
b, U, b4 ~9 |; \* q0 ~' c# V# Q 2.血浆: y+ L X- P+ o5 ^& @5 H" h
用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
3 V+ t8 a$ V0 r! ]3 w* m 常用的抗凝剂为EDTA等，检测时还应仔细阅读试剂盒说明书，检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
8 z" u" z) g4 y7 Z9 k9 U! i9 P 3.细胞培养上清4 }- g" m; n& ]3 y% H Q) m# y
取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。. |, C9 ~( I. K$ ^/ U& G
4.组织匀浆液- M, K& U6 k& X! `
1) 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。: J* v1 q) _9 W7 K1 a# J2 ]
2) 将组织块称重，记录后剪碎，碎块应尽量小，便于匀浆得更充分。% `5 p( {, c: w
3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS（临用前加入蛋白酶抑制剂）匀浆，匀浆时置于冰上或冰浴中。（通常按组织重量：PBS体积=1:9的比例匀浆，例如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数）。( _: C2 F2 A5 U) F& w6 [1 i* s W" X
4) 吸取匀浆液到离心管，4℃5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。
8 `, S! s9 R- O, c; \7 C; W 尿液、唾液等其他液体生物样本$ P& e/ r6 I1 O* l; U
1000×g离心20min，取上清即可检测。1 B, b; s9 n7 q# V7 w! ~ E
总的来说，因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。$ z' u" V# Y$ `' c
为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。另外，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会抑制HRP的活性，从而导致假阴性的结果。( x% H7 ^$ w3 E( |5 h9 Z3 {& V
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