当FUT8 细胞系实验新手使用血清时遇到这些问题应该“淡定”处理:8 _. p1 k+ J* ?6 g4 u$ c
1. 怎样去除沉淀物?
3 p I. D* A ^& L% t* r6 m# u! p3 S" W 技术解答:若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。& B# ]$ _9 T! O1 s9 S( D, t
2. 我的FBS部分解冻,该怎么办?. o9 n$ |8 Y- ?8 [ ~
技术解答:让血清*解冻,轻轻旋转血清瓶, 然后重新冷冻血清。血清质量不会受到影响。
' e) {7 O" A4 E5 a. ^1 Q% ~ 3. 怎样热灭活血清?
0 y* D# V5 l5 u 技术解答:血清热灭活是在水浴56度,保持30分钟。水位应该高于血清水位。在热灭活过程中,温度的调节,通过监控含同样体积的水的参照瓶里的水温进行调节。在热灭活过程必须旋转瓶子每5 分钟混合一次,确保受热均匀。使用的温度计必须经过校准! 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。8 B, ]% F- ~0 T+ a C
如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么黑点的出现可能是因为:
: |4 s" I; E1 }( L" g ·配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长。+ R$ ~% z; y- N$ [+ \. K$ A, ~+ l$ ^1 d
·血清质量不好,反复冻融的结果。 i L8 \ b8 Z) L1 |, f* g7 \$ N8 _7 }; Z
·培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
1 R4 P* `( H+ {6 ~ ·细胞生长过老,破碎的细胞残骸。- E# e: K f9 }# U) P
·配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点。! y, W3 ~5 _& H& s2 j
好的血清才能让实验更加成功,结果更加精准,所以选择一个好的血清对您的实验来说是非常有必要的。如果您在选购血清的时候关于血清的纯度,浓度有任何怀疑的话,那么就来恒远吧!我司专业供应优质血清多年,质量和口碑毋庸置疑。
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