, c: |& {& ^4 m7 z- W
我们知道，羊驼抗体生产Elisa可分为多种类型测定，是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。我公司技术部将各种Elisa常用方法的优势劣势进行对比，结果如下：
: a0 d' x) {+ n7 V) w 一、直接法(direct Elisa): L0 Z( ~ l" H+ ~& d
将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
0 N; K; v t# } 1.优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。- e; ~) [( q, A- N% m8 J
2.劣势：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。
0 }0 [, t, _# F9 B( y- x 二、间接法(indirect Elisa)
7 h1 F9 u- ?. C3 ?9 v/ g% A* l- | 此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
: T& }/ V" B3 f( I) u! m 1.优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它*多的免疫反应性。& z% l0 f' O+ s) T
2.劣势：交互反应发生的机率较高。! s. }( F) F( v+ }3 N2 N1 f
三、双抗体夹心法(sandwich Elisa)
7 O( P# ]( U/ L# [) a8 O$ X( W3 Z 被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。# s# }9 |+ o; e; |1 d6 T
1.优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。1 t3 G$ [# |4 B9 F% y
2.劣势：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
+ ~+ F# \& I1 Z 四、竞争法(competitive Elisa)" j6 Y6 U' O, r( j4 I0 u
样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体，当样品里的自由抗原越多，就可以结合越多的抗体，而固定抗原就只能结合到较少的抗体，反之亦然。经清洗步骤，洗去自由抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较，根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。+ K. ^$ K* a7 ]5 q I) G
1.优势：可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。4 f$ a2 U* p$ \6 O y" W9 q
2.劣势：整体的敏感性和专一性都较差。. `. G0 B& t6 R1 W
, F7 a; q' f9 y3 ^ |
