抗体药物生产Elisa试剂盒试验原理

heshao · 发表于 2023-04-19 13:50:59

　　抗体药物生产Elisa试剂盒运用双抗体夹心法测定标本中大白鼠类风湿因子(RF)水平。用纯化的大白鼠类风湿因子(RF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中顺次加入类风湿因子(RF)，再与 HRP 符号的类风湿因子(RF)抗体结合，构成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗刷后加底物 TMB 显。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝，并在酸的效果下转化成终究的黄。彩的深浅和样品中的类风湿因子(RF)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），经过规范曲线计算样品中大白鼠类风湿因子(RF)浓度。
　　Elisa试剂盒注意事项
　　1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
　　2．浓洗刷液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。
　　3．各步加样均应运用加样器，并常常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐运用排枪加样。
　　4． elisa试剂盒请每次测定的同时做规范曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于规范品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释必定倍数（n 倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

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