抗体药物研发流程图如何选择更适合的ELisa试剂盒？通常ELisa试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂，前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪，使用方便，缺点是稳定性较差。与单试剂相比，双试剂提高了抗干扰能力，具有稳定性能较好，可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。
6 ^, Z) x. q4 x# z( U0 k 一、试剂空白吸光度# a: B8 F+ f5 ^% L5 ~
用蒸馏水做空白，用的空白液加入试剂作为样品测试，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，应符合生产企业给定范围。这是判定试剂质量的一个有效指标。
5 h$ @6 U- z$ {) |4 P2 L 二、试剂空白变化速率( a# L8 N7 K6 v. p j4 D* t
对于速率法试剂盒，用的空白液加入试剂作为样品测试时，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟(T)后的吸光度（A2），计算试剂空白吸光度变化率（DA/min），应不超过生产企业给定值。测定试剂空白吸光度变化（ΔA/min），用来检查试剂在工作状态下的稳定性。但事实上，试剂空白吸光度变化速率无法反映试剂盒的稳定性，试剂空白吸光度变化速率主要反映干扰程度和仪器的稳定性。) k, I/ \. O& n8 M
三、分析灵敏度1 I4 T3 s- j8 u3 X8 R
用吸光度差值（ΔA）或吸光度变化（ΔA/min）来表示单位浓度的被测物反应所引起的信号变化，其含义类似摩尔消光系数，应符合生产企业给定范围。需要注意的是，分析灵敏度不是越高越好，以适合待测物检测范围为原则。分析灵敏度一般用于批间比较，较能反映制造商的配方、原料的一致性。/ V, }! {& O P
四、线性范围/ n5 i2 \0 l' _! ~
取高浓度样品和低浓度样品按不同比例混合成5个浓度做线性试验。线性范围内的分析性能应符合如下要求：①线性性相关系数r应≥0.990；②线性偏差应不超过生产企业给定值。试剂（盒）的线性范围越宽，临床复测几率越小，但与样品/试剂比例成反比。
7 E6 e5 E$ N: R 五、重复性. U) ~" |2 h5 ^& e3 J/ ?
1. 批内重复性 在重复性条件下，用高、中、低三个水平浓度（高、低浓度应超过参考区间20%～30%，中浓度水平在参考区间之内）的控制血清或新鲜人血清测试试剂，重复测试至少10次。
9 E) @# C: _5 v 2. 批间重复性 用质量控制血清测试3×3（3个批号，每个批号取3瓶）批间差，较能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或冻干试剂还需测定批内瓶间差，测定同一批号的试剂20瓶，用变异系数（CV）来表示。变异系数（CV）不超过生产企业给定值。# ^1 V- Q) C) N+ m" c8 o
六、准确度; R; ]2 a* H9 t- Q8 }0 A
1. 相对偏差 直接用试剂盒测定参考物质（平行3次），评价测定均值与靶值的偏离程度。也可用由参考方法定值的高、中、低三个浓度的人混合血清，用试剂盒平行测定3次，计算均值与定值的相对偏差。& x8 i, x6 T: m4 `1 `/ W% a
2. 比对试验 既无参考物质、参考血清，也无标准品，也可用比对试验来验证准确度。- }: c \4 q& G4 ^
七、校准品溯源、质控品赋值
/ N n7 `, J1 |3 K' k( F 1. 校准品溯源性 根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，明确溯源途径。% B3 g0 v& z1 J
2. 质控品赋值有效性 质控品的测定结果应在试剂盒规定的范围内。
5 [: p1 c8 S C) l! ^6 X- K" q5 L7 {: Q 八、ELisa试剂盒稳定性
( W# O1 N& A5 f; C: ]( C 1. 效期稳定性 取已到效期的试剂盒按以上评价方法对试剂盒性能指标进行评价。9 g6 K) R" ^% ~0 J5 g
2. 热稳定性试验 生化试剂盒一般置2-8℃保存，为了快速有效地评价试剂盒的稳定性，可以用加速试验来估计。- b+ g( t1 r4 c! U" n
3. 开瓶稳定性 干粉试剂开瓶后（复溶后）在规定的储存条件下保存至预期时间内，产品的性能至少应符合线性和准确度的要求。$ o0 i. @' F" |) [9 D1 K: s
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