1、底物污染
+ H# C5 Z4 J) z 细胞系开发流程ELISA试剂盒确保在使用前,底物不被金属离子或氧化剂污染;在实验时留存一些额外的底物,底物本身不应该有颜色。/ h; F- ^- `9 h: H( N8 q" Y& v
2、不正确的洗涤- k8 D8 d7 J8 }! x, J8 i4 Y* h. i
洗涤不充分或省略洗涤步骤中的任何一步均会导致背景色过高。( Q! K, f9 `( A$ W0 t. z; O3 Q% n1 C
解决方法:检查洗涤缓冲液的体积并确保完成所有的洗涤步骤;确保洗涤缓冲液的正确稀释和正确使用。; F% ?+ E" ^* K$ _! K, ^4 A, d, j8 a
3、底物曝光
; m) q% w u+ M/ i 底物曝光会使底物变成蓝色,因此在加入板内之前要保存在暗处(即试剂瓶内)。
7 \( ]! D: f" n F' C3 O 4、错误的孵育时间和温度2 @, T& t- p0 O# f
必须严格按照产品说明书来定孵育时间和温度。0 [) V9 x" Q. i( _4 o1 g
5、HRP的错误稀释; P0 @: o- r4 X5 @# R: r
HRP浓度过高会造成高背景色,因此要严格按照产品说明书稀释。# h- @5 f3 \. e6 w3 p, s
6、包被板保存不当
}; @ u$ _, |5 F ELISA试剂盒如果包被板只用了一部分,一定要正确保存剩余的板条。 ?: _& x2 _0 t& X" M8 m
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