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为什么细胞系开发流程ELISA试剂盒实验背景过高?

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heshao 发表于 2023-04-01 22:23:25 | 显示全部楼层 |阅读模式
  1、底物污染8 U0 X- @1 _' v! c, b8 D
  细胞系开发流程ELISA试剂盒确保在使用前,底物不被金属离子或氧化剂污染;在实验时留存一些额外的底物,底物本身不应该有颜色。
. T) b& U& y3 `' Y$ T  2、不正确的洗涤7 `+ C" E. K* A  }# Y6 R$ C! K: v
  洗涤不充分或省略洗涤步骤中的任何一步均会导致背景色过高。
. O; t8 B2 b- h! |# ?$ \  解决方法:检查洗涤缓冲液的体积并确保完成所有的洗涤步骤;确保洗涤缓冲液的正确稀释和正确使用。. I; |! }$ E% u& D7 i) {" g/ s
  3、底物曝光
0 W/ a3 ]# m9 H: i0 |( q' x  底物曝光会使底物变成蓝色,因此在加入板内之前要保存在暗处(即试剂瓶内)。
! B! p' X- ~+ h/ x# B' k3 e  4、错误的孵育时间和温度
, |5 X6 Q4 I  u8 p( Z, Y( P  必须严格按照产品说明书来定孵育时间和温度。
& S4 h6 U# F/ e( j3 B  5、HRP的错误稀释
' y8 N4 @- K+ A5 P3 e3 v  HRP浓度过高会造成高背景色,因此要严格按照产品说明书稀释。; [7 e/ @, V; A, Z$ ^( m( ~
  6、包被板保存不当( s8 Y! K4 m: n9 f; h; m
  ELISA试剂盒如果包被板只用了一部分,一定要正确保存剩余的板条。0 B  B+ Q8 Y5 L! k. y/ g
2 `! l$ E: T3 @4 [
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