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ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。生产抗体的公司在这种测定方法中有3种必要的试剂：
& e; ^3 k4 w4 o+ n7 r9 e ①固相的抗原或抗体。
3 p7 P' |& U3 R2 s7 G8 {8 Z _ ②酶科记的抗原或抗体。 K' J* r9 U9 D
③酶作用的底物。; z/ P$ i6 K) |+ @4 T8 R" O" y. _
根据ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
% e0 A; Q' y, @ （一）双抗体夹心法。7 v$ J8 A' p6 L; _
（二）双位点一步法。8 {/ v- j9 y1 G; S4 _
（三）间接法测抗体。
5 W1 A( \4 f1 X& x7 j; W8 p% z( p （四）竞争法。
, ]3 {0 w) e5 z }2 B （五）捕获法测IgM抗体。
- J. _! _+ ^6 H3 K3 x/ F; l; X4 E9 n （六）应用亲和素和生物素。% g4 ?6 b) F. |* r. k% M* T
ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色。
|6 U; k3 ?, @; r' J 操作注意事项9 |3 P# Y* x6 R
1.ELISA试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
. U3 p& j; t U& d8 j6 q 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。% F1 l. q1 a$ h9 e: Y
3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。! }' ^: k0 i @+ n# Y: p b% o
4.所有液体组分使用前充分摇匀。6 t2 h2 p6 i# i' Z7 d, k
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