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生产抗体的公司减少ELISA试剂盒实验误差的小妙招

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heshao 发表于 2023-03-29 20:52:22 | 显示全部楼层 |阅读模式
# V; q2 W# p# u" e$ L# Y3 `
  ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。生产抗体的公司在这种测定方法中有3种必要的试剂:
6 `- z& i7 ^+ j5 v2 ^  ①固相的抗原或抗体。1 g0 }7 u, \& U# Z! f7 g1 X" `" k6 u
  ②酶科记的抗原或抗体。
+ B! F4 v: \, v; V% l# `  ③酶作用的底物。
" L' n  O8 W! A7 R, ?  根据ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
4 t7 a8 d2 e% E9 q2 d$ n  (一)双抗体夹心法。
# X. E! g& g! Q% f8 D( X  (二)双位点一步法。9 X7 O" D+ c* ?* Q
  (三)间接法测抗体。
$ J: u! U! }7 }+ d& b, b/ ?  (四)竞争法。! n; t2 y/ |: t$ _
  (五)捕获法测IgM抗体。
$ Q" P# G( x0 O# \4 @  (六)应用亲和素和生物素。
7 {. Q# o. ^: [- x: a) h* N- x  ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色。) g  i; j5 k$ ?) w
  操作注意事项+ [. C; B0 f, O2 h1 M
  1.ELISA试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。4 U; a( i9 U! W3 p
  2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
4 c1 J* S" H, }! l# C* D& i' Z  3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
+ A) }% Q, U8 e% h  U  4.所有液体组分使用前充分摇匀。
" l9 ^# P8 O0 C% ^# n( ^7 ~, ~# a7 @
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amy328 发表于 2026-02-16 21:16:47 | 显示全部楼层
楼主辛苦了,整理这么多内容,必须点赞收藏
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参与就好 发表于 2026-03-14 17:09:08 | 显示全部楼层
内容很干货,没有多余的废话,值得反复看
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