( f$ H' @9 q! |# f! u ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。生产抗体的公司在这种测定方法中有3种必要的试剂：/ i8 J1 Z7 d( e7 `
①固相的抗原或抗体。
9 M+ |* ~- I9 _9 J5 |" e: K1 h ②酶科记的抗原或抗体。
# r# |4 {4 |1 L5 I1 G5 u9 o ③酶作用的底物。
( J: q5 r1 {2 O! T$ ^$ H' J2 Y; i 根据ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
! O* T) o* G$ s0 Z （一）双抗体夹心法。1 ~* I9 a3 M4 {' W
（二）双位点一步法。0 _9 k8 o$ S6 N2 f% ~$ ~2 g
（三）间接法测抗体。: p- p6 Y+ S- M* }- u6 C
（四）竞争法。, v1 z6 F0 Q3 h0 {
（五）捕获法测IgM抗体。+ T/ ?" O6 x7 S+ |) C- I
（六）应用亲和素和生物素。 ?1 k3 m. R# r2 z
ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色。
: v. Z8 J3 w1 g% A, M 操作注意事项
% m. y' H7 @+ T: I% C 1.ELISA试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。; N M/ J: H" M, ?0 j* y1 y) a" B
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
" Y" F" [2 |- Y5 T' y) h 3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
$ ^; R+ X* `( X 4.所有液体组分使用前充分摇匀。
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