我们都知道ELISA试剂盒“花板”带来的一系列问题,对检测数据造成很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中必须要注意和避免的。针对这个问题,总结出四个方法,亲和力测定服务让您远离ELISA实验“花板”现象
/ _& Y) s( ?: R% [/ r6 ? 一、标本/试剂/仪器
6 N6 S0 {+ g/ D8 r, j6 `. M 1.标本:出入境人员的血液标本。
5 t: k4 |$ l/ L* l) U# N1 i 2.试剂:HBsAg、HCV、HIV、梅毒试剂均为不同厂家的Elisa试剂盒。
4 ?& S' @3 P# S: Y! p* P. J; w+ Y 3.仪器:LD4-2型脑心机BID RAD1575型洗板机BID RAD550酶标仪。
6 d% `" [7 Y% U! z 二、方法
* ~0 y2 ?: c" F N 所有被检出入境人员的血液标本,按照各个厂家提供的Elisa试剂盒说明书进行HBsAg-HCV-HIV梅毒等检验项目操作。所有试剂均在有效期内使用。
, I5 s( z( G' k" |, u1 K, Z- F 三、结果& `8 x( h- O! H* w7 D
所使用不同厂家的试剂有时会出现“花板”问题。1 h: A0 }% `1 R# Y. I* I7 k
四、分析
" X) S9 O! f8 g5 w3 B 在所有标本进行检测的过程中,所用的仪器及加样过程都处于正常状态的情况下,步骤均按照各种试剂说明书的要求去做,排除实验所用仪器和操作步骤对实验结果的影响外,ELISA试剂盒内的空白、阴性和阳性对照以及室内质控值都很正常,只有检测的血液标本情况异常。根据国家和疾控中心报告阳性率的比例不应该是很高的情况下,HBsAg在用ELISA之前都经过了快速金标试剂的检测,阳性标本得到了一定的控制。因此,原因可能是在标本的处理,特别是放置时间、离心速度和离心时间方面的问题。所以,标本的处理就成为实验结果的主要可疑因素。 |