抗体CMC生物中性蛋白酶(NP)检测试剂盒试剂组成介绍如下+ o) T' \% R+ h! a, N4 |2 j7 b
中性蛋白酶(NP)检测试剂盒! B2 ?. j$ R1 A
测定意义：1 X8 r6 ]" K% v! i, w1 }9 x
NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。
9 N5 `1 }( c* f+ `$ }, o$ H 测定原理：
/ {4 y- _# b/ ]0 x$ P9 i5 K# N 中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。" Z4 d1 t" p& [$ ~5 W; w! R5 L {( }
自备仪器和用品：
7 b7 |8 q( [3 ?2 _$ R0 C 可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸馏水。
7 j1 h* c( H, k 试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存。
7 T4 L. d0 {$ v/ a 试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加10 mL蒸馏水溶解。. O/ G, r/ i$ P* t6 Z* V: `0 z" m
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入20 mL试剂一，沸水浴中磁力搅拌溶解。（可在烧杯上盖一层保鲜膜，注意观察，避免水分全部蒸发，一般加热15-30分钟，该试剂为过饱和试剂，充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用）。; Z) @5 r1 ?$ i# z8 S R8 Z
试剂四：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加50 mL蒸馏水溶解。6 [6 m5 A- K& j6 o& U) M; {
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存。 c$ M6 _# u: V1 O1 @
标准品：液体1mL×1支，0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。
# r5 r1 Q6 D. C 粗酶液提取：
5 A, U+ |+ M% N0 [, }4 I" ^/ k 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5——10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。) S1 Q# o0 p/ Z& K; `
2.血清或培养液：直接测定。
, c k1 M" V' \$ G 3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500——1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。2 L7 z% t2 q% h. G, @
注 意： 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
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