mRNA生产工艺植物生长激素释放肽ELISA试剂盒

　　实验原理
0 T6 ]1 m% v: r* L$ P8 I$ ~　　mRNA生产工艺试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被植物生长激素释放肽（GHRP-GHrelin）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物生长激素释放肽（GHRP-GHrelin）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
8 M5 @+ k3 V+ R' r7 }: F- j6 D　　样本处理及要求
3 i0 w% `  j' p1 X　　1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
9 n: h4 k' O4 H* J3 G( P　　2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
　　3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
; j- [3 w5 N1 g0 b　　4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
  `6 V9 D! X5 w; ~　　注：标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
8 Y/ |* ], }5 ?) _　　需要而未提供的试剂和器材
　　酶标仪（450nm）
5 r6 o4 M$ x" N2 Z6 `1 Q, v7 U, u$ W" ^　　高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
, D9 u( t) k4 H% O　　37℃恒温箱
　　蒸馏水或去离子水