找回密码
 加入怎通
查看: 730|回复: 0

抗体药物研发流程图常温细胞应该如何处理呢?

[复制链接]
heshao 发表于 2023-04-22 16:31:10 | 显示全部楼层 |阅读模式
  抗体药物研发流程图常温细胞应该如何处理呢?! w. L: \- G; E
  1. 首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。
+ @% |7 H. f6 T- S* K0 Y2 D# j( S  2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量丛瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内趋置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
5 R& E0 [. f2 j# P# E! R  3. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。6 \( m# i1 u) l9 D$ {
  4. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态;建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。+ ^* \! @2 }0 r+ S. M. L: P
  5. 贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5m左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。) x6 ~' M$ ~. ^$ Q
  6. 悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离 心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5m培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密,度达80%左右时再进行传代操作。. l) ~' w. B$ j& I( |# w& E# I
  温馨提醒:( G" o$ O5 ^  R7 L8 b1 A
  可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中备用;细胞*传代时,可以将该培养基按照一定比例和客自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。; I: \6 T4 h  p

  \& Y/ d8 \. K$ v" I" Y) b
回复

使用道具 举报

    您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入怎通

    本版积分规则

    QQ|手机版|小黑屋|网站地图|真牛社区 ( 苏ICP备2023040716号-2 )

    GMT+8, 2026-7-7 00:57 , Processed in 0.050984 second(s), 28 queries , Gzip On.

    免责声明:本站信息来自互联网,本站不对其内容真实性负责,如有侵权等情况请联系420897364#qq.com(把#换成@)删除。

    Powered by Discuz! X3.5

    快速回复 返回顶部 返回列表