灌流细胞培养二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，上通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以广泛应用，如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗针对某一特定物种的所有抗体均具有特异性，因而使用特定标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。8 B# f/ h& r4 h" v/ S. M' U
1 U' M# f6 N& q# R9 p5 D- q 二抗，广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从以下几个方面考虑： 5 \; E6 v4 i* f6 l) a$ p0 b# P3 [% Y. n
1.一抗的种属来源 9 o8 n9 D: x" s O6 p+ ~# t% ^; n! @$ l 根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。例如：一抗是小鼠源的单克抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或兔抗小鼠等）。! m* J2 } u. \) z7 S
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2.一抗的类别亚型" \8 a, v- Y/ O; Z
" I* E* M9 b* ~3 O% ~& i 二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。单克隆抗体的类别及亚型通常会在产品说明书中有描述，如果一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚型的二抗。此种抗体在双标记实验中尤其合适。 " K1 J! a# P! Z8 w2 ?% R& Z" u+ e3 F% ?0 I4 T3 a/ z& n
3.二抗的藕联标记/ u+ X1 K9 }3 e
' j+ \9 \. P3 Q2 D$ W9 F* F9 H 一般来讲，藕联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP）、荧光基团、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。WB和ELISA常用的二抗是酶标二抗，而免疫荧光实验中通常使用荧光基团标记的二抗，而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。/ e7 G7 W/ R1 j' H- \. o
* g& e- \; M9 c 写在最后：抗体广泛应用于各种科研领域，且价格不菲。谨慎选择质量可靠，适用的抗体能够有效避免科研时间及成本的浪费，不要因为贪图便宜，选择了一些“平价替代"产品，其质量及售后，无法有效保证。1 g8 o2 A* m3 C4 {8 i
